ВАЛІДАЦІЯ МЕТОДУ LC-MS/MS ДЛЯ ВИЗНАЧЕННЯ 25-ГІДРОКСИВІТАМІНУ D У СИРОВАТЦІ КРОВІ ДІТЕЙ ЗА СТАНДАРТАМИ VDSP

В.В. Бабієнко; А.М. Рожнова

doi:10.32402/

Автор(и)

В.В. Бабієнко Одеський національний медичний університет, м. Одеса, Україна Автор
А.М. Рожнова Одеський національний медичний університет, м. Одеса, Україна Автор

DOI:

https://doi.org/10.32402/

Ключові слова:

25-гідроксивітамін D, LC-MS/MS, VDSP, ECLIA, гігієнічний моніторинг.

Анотація

МЕТА. Верифікація методу LC-MS/MS для визначення 25(OH)D у сироватці крові дітей відповідно до вимог VDSP та порівняння його з методом ECLIA для обґрунтування застосування в гігієнічному моніторингу.

МАТЕРІАЛИ І МЕТОДИ. Дослідження базувалося на ретроспективній лабораторній базі (понад 70 000 аналізів, 2022–2025 роки) та проспективній репрезентативній вибірці дітей 3–17 років (n=562; 289 хлопчиків, 273 дівчинки) Південного регіону України (2023–2025 роки). Верифікацію LC-MS/MS проводили за чотирма рівнями NIST SRM 972a та критеріями VDSP. Порівняння з ECLIA (Roche Cobas) виконано в підвибірці (n=120) з використанням кореляційного аналізу, регресії Passing-Bablok, Bland-Altman та ICC.

РЕЗУЛЬТАТИ. Метод LC-MS/MS показав високу прецизійність (загальний CV≤7,3%) та правильність (bias від –2,0% до –0,8%), повністю відповідаючи вимогам VDSP. Участь у DEQAS підтвердила стабільність результатів протягом 2022–2025 років. Порівняння з ECLIA виявило високу кореляцію (r=0,97; p<0,001), але систематичне завищення результатів імуноаналізу (+6,5 нмоль/л; 95% LoA: –6,4 до +19,4 нмоль/л). У дитячій вибірці недостатність 25(OH)D (<50 нмоль/л) становила 71,9%, дефіцит (<30 нмоль/л) – 25,3%, з достовірним погіршенням показників з віком (p<0,001).

ВИСНОВКИ. Метод LC-MS/MS верифіковано за вимогами VDSP/DEQAS і рекомендовано як референтний для гігієнічного моніторингу вітамін D-статусу дітей в Україні. ECLIA систематично завищує рівень 25(OH)D, що слід враховувати в клінічній практиці.

Завантажити

Дані для завантаження поки недоступні.

Посилання

1. Munns CF, Shaw N, Kiely M, Specker BL, Thacher TD, Ozono K et al. Global Consensus Recommendations on Prevention and Management of Nutritional Rickets. J Clin Endocrinol Metab. 2016 Feb;101(2):394–415.

doi: https://doi.org/10.1210/jc.2015-2175

2. Shatylo S, Bogomaz V, Babych O. Vitamin D deficiency in Ukraine: A multicentre cross-sectional study. Glob Epidemiol. 2024 Oct 10;8:100170.

doi: https://doi.org/10.1016/j.gloepi.2024.100170

3. Sempos CT, Vesper HW, Phinney KW, Thienpont LM, Coates PM; Vitamin D Standardization Program (VDSP). Vitamin D status as an international issue: national surveys and the problem of standardization. Scand J Clin Lab Invest Suppl. 2012;243:32–40. Available from: https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/22536760/

4. Wise SA, Camara JE, Burdette CQ, Hahm G, Nalin F, Kuszak AJ et al. Interlaboratory comparison of 25-hydroxyvitamin D assays: Vitamin D Standardization Program (VDSP) Intercomparison Study 2 - Part 1 liquid chromatography - tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) assays - impact of 3-epi-25-hydroxyvitamin D3 on assay performance. Anal Bioanal Chem. 2022 Jan;414(1):333–49.

doi: https://doi.org/10.1007/s00216-021-03576-1

5. Wise SA, Camara JE, Burdette CQ, Hahm G, Nalin F, Kuszak AJ et al. Interlaboratory comparison of 25-hydroxyvitamin D assays: Vitamin D Standardization Program (VDSP) Intercomparison Study 2 - Part 2 ligand binding assays - impact of 25-hydroxyvitamin D2 and 24R,25-dihydroxyvitamin D3 on assay performance. Anal Bioanal Chem. 2022 Jan;414(1):351–366.

doi: https://doi.org/10.1007/s00216-021-03577-0

6. Cho SE, Han J, Chun G, Choi R, Lee SG, Park HD. Assessment of Serum 3-Epi-25-Hydroxyvitamin D3, 25-Hydroxyvitamin D3 and 25-Hydroxyvitamin D2 in the Korean Population With UPLC-MS/MS. J Clin Lab Anal. 2025 Oct;39(19):e70098.

doi: https://doi.org/10.1002/jcla.70098

7. Binkley N, Sempos CT; Vitamin D Standardization Program (VDSP). Standardizing vitamin D assays: the way forward. J Bone Miner Res. 2014 Aug;29(8):1709-14.

doi: https://doi.org/10.1002/jbmr.2252

8. Wang J, Li X, Gan Y, Fan T, Yang J, Rao F, Yang J. Comparison of the Serum Total 25-Hydroxyvitamin D Concentrations Using Chemiluminescent Immunoassay and Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry in Children. J Nutr Sci Vitaminol (Tokyo). 2022;68(3):181–8.

doi: https://doi.org/10.3177/jnsv.68.181

9. Xing Y, Wang K, Ma X, Zhang H, Tian X. Correlation and consistency between two detection methods for serum 25 hydroxyvitamin D levels in human venous blood and capillary blood. Front Nutr. 2024 Jun 11;11:1291799.

doi: https://doi.org/10.3389/fnut.2024.1291799

10. Durazo-Arvizu RA, Tian L, Brooks SPJ, Sarafin K, Cashman KD, Kiely M et al. The Vitamin D Standardization Program (VDSP) Manual for Retrospective Laboratory Standardization of Serum 25-Hydroxyvitamin D Data. J AOAC Int. 2017 Sep 1;100(5):1234–43.

doi: https://doi.org/10.5740/jaoacint.17-0196

11. Rozhnova AM. Suchasni pidkhody do profilaktyky defitsytu vitaminu D u ditei u konteksti diiety ta rivnia insoliatsii: ohliad literatury [Modern approaches to the prevention of vitamin D deficiency in children in the context of diet and insolation level: a literature review]. Prospects and Innovations in Science. 2024;10(44):1443-57. Ukrainian.

doi: https://doi.org/10.52058/2786-4952-2024-10(44)-1443-1457

12. Clinical and Laboratory Standards Institute. EP15-A3: user verification of precision and estimation of bias: approved guideline. 3rd ed. Wayne, PA: CLSI; 2014.